论著
乳腺癌中肿瘤相关成纤维细胞原代分离、培养及相关生物学特性分析
肿瘤研究与临床, 2017,29(8) : 510-514. DOI: 10.3760/cma.j.issn.1006-9801.2017.08.002
摘要
目的

探索乳腺癌中肿瘤相关成纤维细胞(CAF)稳定可行的原代分离、培养方法,探讨CAF的生物学特性。

方法

取10例未进行任何放疗、化疗及内分泌治疗的手术切除乳腺癌组织及其癌灶外缘2 cm处的配对癌旁组织,采用组织块酶消化法分离培养CAF。流式细胞术检测细胞周期,细胞免疫化学法检测CAF生物学标志波形蛋白(Vimentin)、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)以及细胞增殖指标Ki-67表达情况,Transwell小室侵袭、迁移实验检测CAF侵袭、迁移能力。

结果

通过条件优化,成功分离培养CAF。细胞免疫化学结果提示,CAF高表达Vimentin、α-SMA以及Ki-67。流式细胞术结果显示,CAF较乳腺癌旁成纤维细胞S期细胞比例增加,提示CAF增殖能力强,分裂增殖活跃。CAF具有很强的侵袭、迁移能力[CAF组和乳腺癌旁成纤维细胞组侵袭细胞数分别为(79.7±3.5)、(66.3±1.5)个,迁移细胞数分别为(242.3±3.1)、(218.3±2.1)个,均P<0.05]。

结论

优化组织块酶消化法并成功分离、培养CAF。CAF具有较强的分裂增殖能力和侵袭迁移能力。

引用本文: 张春敏, 郭变琴, 吴立翔. 乳腺癌中肿瘤相关成纤维细胞原代分离、培养及相关生物学特性分析 [J]. 肿瘤研究与临床,2017,29( 8 ): 510-514. DOI: 10.3760/cma.j.issn.1006-9801.2017.08.002
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近年来,越来越多的研究发现,恶性肿瘤的发生发展不仅依赖肿瘤细胞本身,肿瘤微环境同样具有极其重要的作用[1]。肿瘤微环境由肿瘤细胞、基质细胞(如脂肪细胞、成纤维细胞、内皮细胞等)以及细胞外基质共同组成[2,3,4]。肿瘤相关成纤维细胞(cancer-associated fibroblast,CAF)是活化的成纤维细胞,是肿瘤微环境中最主要的细胞,几乎存在于所有实体肿瘤组织中,CAF分泌的生长因子、细胞因子以及趋化因子等通过细胞-细胞间作用或与肿瘤细胞交互对话在肿瘤发生发展中扮演了重要的角色[5,6,7]。本研究通过优化方法对乳腺癌CAF进行原代分离培养,并对CAF生物学特性进行分析,为后续CAF在乳腺癌发生发展中作用的研究提供实验依据。

 
 
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肿瘤侵润
细胞运动
细胞培养技术
成纤维细胞
乳腺肿瘤