论著
细胞因子诱导的凋亡抑制因子1靶向miRNA预测及其在乳腺癌耐药细胞株中的表达
肿瘤研究与临床, 2016,28(11) : 735-738. DOI: 10.3760/cma.j.issn.1006-9801.2016.11.004
摘要
目的

预测并筛选与细胞因子诱导的凋亡抑制因子1(CIAPIN1)基因3'非翻译区(3'UTR)高度匹配的目标miRNA,并初步探讨乳腺癌亲本细胞株及耐药细胞株中CIAPIN1蛋白及目标miRNA表达间的靶向关系。

方法

应用TargetScan、PicTarmi、miRanda数据库预测CIAPIN1基因3'UTR可能存在的种子结合位点miRNA,并根据文献筛选出目的miRNA。Western blot法检测易成瘤的乳腺癌细胞株MCF-7、三阴性乳腺癌细胞株MDA-MB-231、人表皮生长因子2(HER2)高表达的乳腺癌细胞株MDA-MB-453及相对应的3种耐紫杉醇的乳腺癌细胞株MCF-7/Tax、MDA-MB-231/Tax、MDA-MB-453/Tax中CIAPIN1蛋白的表达情况。实时定量聚合酶链反应(PCR)法检测乳腺癌亲本细胞及其耐药细胞中目的miRNA的表达情况。

结果

预测并筛选出目标miRNA,分别为miRNA143、miRNA571、miRNA647。Western blot法检测示,与乳腺癌亲本细胞相比,其耐药细胞中CIAPIN1蛋白相对高表达,差异有统计学意义[MCF-7/Tax比MCF-7、MDA-MB-231/Tax比MDA-MB-231、MDA-MB-453/Tax比MDA-MB-453的表达量(相对于内参GAPDH)分别为:0.80比0.21、0.70比0.31、1.00比0.35,均P<0.05]。PCR法检测示,与乳腺癌亲本细胞相比,耐药细胞中miRNA143、miRNA571、miRNA647相对低表达,差异有统计学意义(P<0.05)。

结论

预测并筛选出的与CIAPIN1基因3'UTR区存在种子结合位点的miRNA有miRNA143、miRNA571、miRNA647,各miRNA在耐药细胞株中低表达,而CIAPIN1蛋白相对高表达,提示这些miRNA可能通过靶向调控CIAPIN1基因参与了乳腺癌的多药耐药过程。

引用本文: 路丹, 王文秀, 曲迪, 等.  细胞因子诱导的凋亡抑制因子1靶向miRNA预测及其在乳腺癌耐药细胞株中的表达 [J]. 肿瘤研究与临床,2016,28( 11 ): 735-738. DOI: 10.3760/cma.j.issn.1006-9801.2016.11.004
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乳腺癌属全身性疾病,综合治疗非常关键,其中化疗在乳腺癌的治疗中起重要作用。其治疗的最大障碍是肿瘤多药耐药性(MDR)。随着分子生物学技术的快速发展和人类对乳腺癌耐药机制的不断深入研究,基因治疗逐渐成为肿瘤生物学治疗的重要部分,因此,针对靶点设计逆转肿瘤细胞MDR的药物已成为当今医学界研究的热点。学者们既往研究的重点和治疗的靶点多集中于靶基因本身及其mRNA和蛋白表达上,其基因表达的上游调控机制往往是盲点。本研究预测并筛选细胞因子诱导的凋亡抑制因子1(cytokine induced apoptosis inhibitor1,CIAPIN1)基因3'非翻译区(3'UTR)高度匹配的目标miRNA,并通过对乳腺癌亲本细胞株及耐药细胞株中CIAPIN1蛋白及目标miRNA表达的检测,初步探讨二者间的靶向关系,以期通过miRNA靶向调控CIAPIN1基因,进而提高耐紫杉醇乳腺癌细胞对紫杉醇的敏感性。

 
 
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乳腺肿瘤
微RNA
多药耐药性
细胞因子诱导的凋亡抑制因子1