论著
含甲氨蝶呤的肿瘤源性微粒联合放疗体外对肺腺癌干细胞增殖的影响
肿瘤研究与临床, 2016,28(10) : 654-658,663. DOI: 10.3760/cma.j.issn.1006-9801.2016.10.002
摘要
目的

探讨肿瘤微粒包装的甲氨蝶呤(T-MP MTX)联合放疗体外对肺腺癌干细胞增殖的影响。

方法

制备非小细胞肺癌A549细胞来源的T-MP MTX。MTT法检测不同浓度T-MP MTX作用的A549、H460细胞及支气管上皮细胞株16HBE细胞增殖变化;流式细胞术检测空白组、T-MP MTX组A549细胞周期;肿瘤球形成实验和动物实验检测空白组、T-MP MTX组(对照组)及T-MP MTX联合放疗组(2 Gy组、4 Gy组、6 Gy组)肿瘤干细胞增殖情况;Western blot检测肿瘤干性相关基因β-catenin、Nanog、SOX-2、KLF4等表达变化。

结果

四甲基偶氮唑盐(MTT)检测结果显示,T-MP MTX呈浓度依赖性地抑制A549细胞增殖,对H460细胞及16HBE细胞增殖无明显抑制作用。流式细胞仪检测结果显示,空白组和T-MP MTX组中S期细胞比例分别为(15.83±3.14)%和(47.47±6.69)%,T-MP MTX组较空白组明显增高(t=7.411,P=0.002)。肿瘤球实验结果发现,空白组、对照组、2 Gy组、4 Gy组、6 Gy组肿瘤球的数量分别为(268.9±22.4)、(172.4±18.7)、(48.3±5.1)、(16.3±3.5)、(5.1±3.1)个,组间差异有统计学意义(F=228.291,P=0.000);与空白组比较,对照组、2 Gy组、4 Gy组、6 Gy组肿瘤球的数量均减少,差异均有统计学意义(均P<0.05);与对照组比较,2 Gy组、4 Gy组、6 Gy组肿瘤球数减少(均P<0.05),且随放疗剂量增高,减少幅度增大(F=95.142,P=0.000)。肿瘤球体积分析结果与肿瘤球数量对比结果相似。Western blot检测结果显示,T-MP MTX单独处理A549细胞后β-catenin、KLF4、Nanog、SOX-2等肿瘤干细胞相关基因表达水平有所下降,而T-MP MTX联合放疗处理后明显加强这种抑制作用。动物实验结果显示T-MP MTX组移植瘤荧光素酶活性较空白组下降(P=0.000),而T-MP MTX+2 Gy组移植瘤荧光值下降更为明显(t=6.887,P=0.002)。

结论

T-MP MTX可能具有较高的放疗增敏作用,与放疗联合能协同抑制肺腺癌干细胞增殖,其机制可能与激活低代谢状态的肿瘤干细胞和阻断细胞周期进程有关。

引用本文: 郑学嵩, 王映, 蒙以良, 等.  含甲氨蝶呤的肿瘤源性微粒联合放疗体外对肺腺癌干细胞增殖的影响 [J]. 肿瘤研究与临床,2016,28( 10 ): 654-658,663. DOI: 10.3760/cma.j.issn.1006-9801.2016.10.002
正文
作者信息
基金 0  关键词  0
English Abstract
评论
阅读 0  评论  0
相关资源
论文 | 视频

版权归中华医学会所有。

未经授权,不得转载、摘编本刊文章,不得使用本刊的版式设计。

除非特别声明,本刊刊出的所有文章不代表中华医学会和本刊编委会的观点。

外泌体是细胞分泌的一种具有细胞间信使功能的囊泡结构,内含多种包括miRNA、蛋白分子、核酸片段等细胞信息成分[1,2,3]。来源于肿瘤细胞的外泌体又称肿瘤微粒(T-MP),在促进肿瘤增殖、血管形成、放化疗耐药、免疫耐受、上皮间质转化等方面起重要作用。近年研究发现,T-MP可包裹多种化疗药物或病毒等,对相应起源的肿瘤细胞具有较高亲和性,而对其他细胞的结合力较低,是一种高效的靶向药物载体[4]。放疗是恶性肿瘤的主要治疗手段之一,70%的恶性肿瘤患者可通过放疗得到不同程度的治疗效果。但不同细胞周期的肿瘤细胞放疗敏感性存在差异。如何更有效地提高放疗敏感性,减少放疗或放疗增敏药物的毒副作用,一直是研究的热点。肿瘤干细胞(cancer stem cells,CSC)被认为是肿瘤复发和转移的根源,其干性维持需要一些特定基因和信号通路,包括β-catenin、SOX-2、Oct4、KLF4、Nanog等,它们在肿瘤干细胞自我更新和增殖方面具有重要的调控作用[5,6,7]。本研究探讨非小细胞肺癌细胞株A549来源肿瘤微粒包装的甲氨蝶呤(T-MP MTX)联合放疗对肺癌CSC增殖的抑制效果及其潜在机制。

 
 
展开/关闭提纲
查看图表详情
回到顶部
放大字体
缩小字体
标签
关键词
肿瘤源性微粒
肿瘤干细胞
细胞周期
肺肿瘤
甲氨蝶呤
放射疗法