论著
人胃癌原发灶与淋巴结转移灶的差异蛋白质组学研究
肿瘤研究与临床, 2015,27(9) : 586-588,592 . DOI: 10.3760/cma.j.issn.1006-9801.2015.09.003
摘要
目的

利用比较蛋白质组学技术识别并鉴定胃癌原发灶与淋巴结转移灶中的差异表达蛋白质,筛选特异性的转移相关蛋白,探讨胃癌淋巴结转移的分子机制。

方法

将前期应用二维差异凝胶电泳技术(DIGE)获取人胃癌原发灶及转移灶差异蛋白表达图谱进行分析获得的11个差异表达蛋白质,运用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)进行鉴定,得到相应的肽质量指纹图(PMF),然后搜索数据库鉴定出部分蛋白质。利用免疫组织化学技术检测HSP 70在胃癌中的表达水平。

结果

对11个差异蛋白质点进行PMF分析后,通过Mascot软件查询鉴定出其中5个蛋白质点(HSP70的8同种型2变异体、2个伴侣蛋白、亮氨酸氨肽酶、预测假想蛋白XP_515584)。HSP70、伴侣蛋白、亮氨酸氨肽酶的表达在原发癌灶中明显升高。免疫组织化学检测示HSP 70的表达水平随着胃癌恶性程度的增加及淋巴结的转移逐渐增加,与蛋白质组学的分析结果一致。

结论

人胃癌原发灶与淋巴结转移灶中腺癌细胞的差异蛋白表达图谱相似,说明两者癌细胞的来源、分化程度相对一致,仅有少数蛋白质的质和量发生了明显变化,参与了淋巴结转移。其涉及细胞生理活动的各方面,与肿瘤的发生、发展等密切相关。HSP70参与了胃癌的发生发展,其表达水平与胃癌有无淋巴结转移及恶性程度有密切关系。

引用本文: 柴丽丽, 陈燕, 王娟红, 等.  人胃癌原发灶与淋巴结转移灶的差异蛋白质组学研究 [J]. 肿瘤研究与临床,2015,27( 9 ): 586-588,592 . DOI: 10.3760/cma.j.issn.1006-9801.2015.09.003
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胃癌发病机制的基因组学研究已取得很大成功。但由于蛋白质是细胞功能的最终执行者,而非DNA、RNA,且蛋白质执行功能时是多样的、动态的,DNA、mRNA的改变不能完全反映细胞内蛋白质的变化情况,蛋白质存在多种翻译后修饰(磷酸化、糖基化、巯基化、乙酰化等)、转运定位、构象改变及蛋白质间相互作用等,因此若能直接从蛋白质入手来研究胃癌,并与胃癌中DNA、mRNA的改变相印证,通过寻找特异表达蛋白质及逆向寻找相关基因来诠释其发病机制,无疑为其诊断治疗的一条捷径。我们先期利用非染色冷冻切片显微切割的方法纯化人胃癌原发灶及淋巴结转移灶中的腺癌细胞,应用二维差异凝胶电泳技术(DIGE)获取了11个差异表达蛋白质[1],现结合激光解吸电离飞行时间质谱(Matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry ,MALDI-TOF-MS)进行癌细胞中差异表达蛋白质的分析及鉴定,为建立胃癌的蛋白质组数据库、发现胃癌转移相关蛋白质、分析胃癌转移相关蛋白质结构和功能及揭示胃癌转移的分子机制提供依据。

 
 
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腺癌
光谱法,质量,基质辅助激光解吸电离
显微切割
蛋白质组学
淋巴转移
胃肿瘤